Святитель Иоасаф происходил из дворянского рода Скрипицыных. Постриг он принял в обители преподобного Сергия, а в 1529 году митрополит Даниил поставил его игуменом Троице-Сергиева монастыря. Великий князь Василий III особенно ему доверял: в сентябре 1530 года именно игумен Иоасаф крестил новорождённого наследника — будущего царя Иоанна IV, а через три года вместе с преподобным Даниилом Переславским крестил и второго княжеского сына, Юрия.

В декабре 1533 года смертельно больной великий князь просил приехавшего в Москву игумена не покидать столицу и молиться о государстве, о сыне и о его собственном согрешении. Иоасаф участвовал в монашеском постриге умирающего князя, которого нарекли Варлаамом. Мантии для нового инока не хватило — свою отдал троицкий келарь. Тело князя выносили в церковь не бояре, а братия двух монастырей.

В феврале 1539 года боярская группировка свела с кафедры митрополита Даниила. Нового первосвятителя выбирали по жребию в московском Успенском соборе из трёх кандидатов, и жребий пал на Иоасафа; 9 февраля его поставили митрополитом. В своём исповедании веры он написал, что следует патриархам, хранящим неповреждённую веру, и обещал не делать ничего в угоду великому князю или князьям вопреки Божественным и священным правилам — хотя бы ему грозили смертью. Обещание это он выполнил до конца.

Время было страшное: малолетство государя, безначалие, боярские расправы. Заботясь о прекращении беспорядков, митрополит выпросил свободу заточённому князю Бельскому, и тот, войдя в думу правителей, действительно сумел остановить грабежи и насилия. Но Шуйские схватили Бельского, отправили на Белоозеро и там умертвили. Попытки святителя положить предел беззакониям навлекли на него лютую ненависть. Толпа едва не убила его, в келью летели камни, во дворце государя защиты не нашлось, на Троицком подворье первосвятителя готовы были растерзать — и лишь игумен Алексий, заклиная именем преподобного Сергия, умолил пощадить его жизнь.

После многих обид митрополита сослали на Белоозеро, в Кириллов монастырь. Позже он выпросил себе милость дожить последние годы там, где давал иноческий обет. Но и в родной обители покоя не было: рядом жили люди, которых загнала в монастырь не вера, а житейские беды, и своим своеволием они не раз оскорбляли блаженного старца.

В уединении святитель продолжал трудиться для Церкви: рассматривал присылаемые ему рассуждения Стоглавого Собора и усердно исправлял книги. О своей работе он писал с трогательным смирением: переписывая жития по разным спискам, находил много неисправного, что мог — исправил, а чего не смог, оставил тем, у кого разума больше. Скончался святитель Иоасаф 27 июля 1555 года. Мощи его почивают под спудом в южном притворе Троицкого собора, в Серапионовой палате. В марте 2017 года по благословению Патриарха Кирилла его имя включили в Собор Московских святителей.

Святителей принято писать в архиерейском облачении, с Евангелием в левой руке и благословляющей правой; митрополита Иоасафа нередко изображают на фоне Троицкой обители.