Иустин родился в Сихеме, древнем городе Самарии, в семье греков-язычников. С детства он тянулся к наукам и хотел одного — понять, что такое истина. Он основательно изучил философские школы своего времени: стоиков, перипатетиков, пифагорейцев, платоников — и пришёл к выводу, что ни одна из них не выводит к познанию Истинного Бога.

Переломом стала встреча за городом, в уединённом месте. Незнакомый старец в долгом разговоре объяснил ему суть христианского учения и посоветовал искать ответы в книгах Священного Писания, а прежде всего — прилежно молиться, потому что истину человек не берёт сам, её открывает Бог тому, кто ищет Его с молитвой и любовью. На тридцатом году жизни Иустин крестился.

Дальше своё образование он употребил на проповедь. Он странствовал по Римской империи, открыл училище, где преподавал христианскую философию, спорил с философом-киником Крискентом и возражал против искажений веры, в частности против учения гностика Маркиона. Около 155 года, когда император Антонин Пий начал гонение, Иустин лично подал ему «Апологию» в защиту осуждённых на смерть христиан. Текст подействовал: император прекратил гонение, а Иустин отправился в Азию, где преследования были особенно сильны, и сам развозил весть об указе по городам. В Ефесе он вёл долгий спор о вере, изложенный потом в книге «Разговор с Трифоном». Вторую «Апологию» он написал уже римскому сенату, в 161 году.

Погиб он в Риме. Крискент, которого Иустин раз за разом побеждал в прениях, возвёл на него ложные обвинения перед судом. Святого взяли под стражу, подвергли истязаниям, и около 166 года он принял мученическую смерть. Мощи его покоятся в Риме.

Кроме двух «Апологий» и «Разговора с Трифоном» ему принадлежат «Замечания о душе», «Обличения против эллинов», «Речь против эллинов»; часть утраченного сочинения «О воскресении» сохранил преподобный Иоанн Дамаскин. Церковный историк Евсевий называет и другие его книги.

Иустина принято писать в одежде античного учёного, со свитком или книгой в руках — по чину христианского философа. Память — 14 июня; для носящих имя Устин это именины.