Апостол Тимофей родом из ликаонского города Листры в Малой Азии. Ко Христу его обратил в 52 году апостол Павел: когда они с Варнавой впервые пришли в ликаонские города, Павел исцелил в Листре хромого от рождения, и многие горожане уверовали. Среди них были юноша Тимофей, его мать Евника и бабка Лоида — об этом упоминают и книга Деяний, и послания.

Семена, посеянные тогда, дали плод. Тимофей стал ревностным учеником, а затем неотлучным спутником и сотрудником Павла в проповеди. Апостол любил его и в посланиях называл возлюбленным сыном, вспоминая с благодарностью его верность и преданность. Ему же он писал, что Тимофей последовал за ним в учении, в жизни, в вере и в терпении гонений.

В 65 году Павел рукоположил его во епископа Ефесской Церкви, которой Тимофей управлял пятнадцать лет. А когда апостол сидел в римской темнице и знал, что ему предстоит мученическая смерть, он вызвал верного ученика к себе на последнее свидание.

Кончина Тимофея тоже была мученической. В Ефесе язычники справляли праздник в честь идолов и носили их по городу. Епископ вышел останавливать и вразумлять шествие, проповедуя истинную веру, — толпа озлобилась и побила его камнями. Это случилось в 80-м году. В IV веке мощи апостола перенесли в Царьград и положили в храме Святых Апостолов.

Церковь чтит Тимофея в числе семидесяти апостолов. Пишут его по апостольскому обычаю — со свитком или книгой в руках; как епископа могут изображать и в святительском облачении. Память совершается 4 февраля.