Ирина, Агапия и Хиония были родными сёстрами и жили в конце третьего — начале четвёртого века неподалёку от итальянского города Аквилеи. Рано осиротев, они вели строгую христианскую жизнь и отказывали многочисленным женихам. Духовно руководил ими священник Зинон. Ему было открыто во сне, что вскоре он умрёт, а девушек возьмут на мучение; то же было открыто и великомученице Анастасии Узорешительнице, которая тогда находилась в Аквилее и безбоязненно навещала христиан в тюрьмах. Анастасия поспешила к сёстрам и укрепляла их. Вскоре Зинон скончался, а сестёр схватили и повели на суд к императору Диоклетиану.

Император предложил юным сёстрам отречься и обещал найти им знатных женихов из своей свиты. Они ответили, что Жених у них один — Христос, и за веру в Него они готовы пострадать; языческих богов они называли идолами, сделанными руками людей. Диоклетиан, отправляясь в Македонию, велел везти их туда же и передал правителю Дулкицию.

Тот, увидев их красоту, воспылал нечистой страстью и обещал свободу в обмен на своё желание. Сёстры ответили, что готовы умереть за Небесного Жениха. Ночью Дулкиций попытался войти к ним силой, но невидимая сила поразила его: он потерял рассудок, кинулся прочь, заблудился, попал в поварню и перепачкался в саже так, что слуги едва его узнали. Решив, что его околдовали, он на суде велел обнажить мучениц, но одежды словно приросли к их телам, а сам он внезапно уснул, и разбудить его не удавалось, пока не внесли в дом.

Узнав об этом, Диоклетиан разгневался и передал дев судье Сисинию. Тот начал допрос с младшей, Ирины, и, убедившись в её непреклонности, отправил в темницу, а старших приговорил к сожжению. Сёстры возблагодарили Бога за мученические венцы и отошли ко Господу с молитвой; когда огонь погас, все увидели, что ни тела, ни одежды не тронуты пламенем, а лица спокойны, как у уснувших. На другой день Сисиний пугал Ирину участью сестёр и грозил отдать её на поругание, но она ответила, что тело можно осквернить силой, а душа отречением не осквернится. Воинов, которые вели её, нагнали двое светлых мужей и передали будто бы приказ правителя оставить девицу на высокой горе; те так и сделали. Сисиний, не отдававший такого приказа, пришёл в ярость, но дороги к вершине не нашёл, и один из воинов ранил мученицу стрелой издали. Она сказала, что смеётся над бессильной злобой и уходит ко Господу чистой, легла на землю и предала дух Богу за день до Пасхи, в 304 году. Тела сестёр с честью погребла великомученица Анастасия.

Сохранился и древний протокол суда — редкий памятник, где записаны сами вопросы и ответы. Из него видно, за что судили младшую сестру: она хранила христианские книги и пергамены и не выдала их, сказав, что предпочла бы претерпеть что угодно, чем отдать написанное. Правитель Дулкиций приказал сжечь эти книги, а её саму приговорил к сожжению; по этой записи мученица сама взошла на костёр, славя Бога и с пением псалмов. Церковное предание сохранило оба рассказа. Мучениц на иконах принято писать в длинных одеждах и с крестом в руке, а трёх сестёр часто изображают вместе.