Антоний и Иоанн были братьями из литовской знати и служили при дворе великого князя Ольгерда. До крещения их звали Нежило и Кумец. Ольгерд принял христианство по расчёту — чтобы жениться на православной витебской княжне Марии Ярославне и расширить владения, — и поначалу вере покровительствовал: разрешил духовнику княгини священнику Нестору проповедовать и позволил построить храмы, два в Витебске и один в Вильне. Этот священник и крестил обоих братьев.

После смерти жены князь под нажимом языческих жрецов вернулся к идолам. Братья же продолжали жить по-христиански и, в частности, не ели скоромного в постные дни. Жрецы потребовали их наказать. Ольгерд уговаривал обоих отречься, не добился своего и бросил их в темницу, где они провели год. Младший, Антоний, держался твёрдо; старший, Иоанн, не выдержал и тайком от брата объявил князю, что готов подчиниться, лишь бы выйти на свободу.

Освободили обоих. Иоанн внешне исполнял языческие обряды, хотя в сердце оставался христианином, и Антоний открыто укорял его за малодушие. Однажды на княжеском пиру в постный день подали мясо: Иоанн побоялся отказаться, а Антоний отказался прямо, назвав себя христианином, — и снова оказался в темнице. Отступника перестали считать своим и христиане, и язычники; он горько каялся, а брат сказал, что примет его, только если тот открыто исповедует Христа. Дождавшись, когда князя окружала толпа придворных, Иоанн громко объявил себя христианином. Его жестоко избили и бросили в ту же темницу.

К темнице сходился народ — посмотреть на братьев; твёрдость узников поразила многих, и люди стали принимать крещение. Тогда жрецы потребовали казни. Первым решили казнить Антония: князь надеялся, что тогда Иоанн снова отречётся. Ночь перед смертью святой провёл в молитве, благодаря Бога за мученический венец и прося укрепить брата. Утром 14 апреля оба причастились, и Антония повели на казнь — его повесили на дубе. Иоанн не поколебался и продолжал проповедовать; 24 апреля 1347 года его удавили, а тело повесили на том же дереве, как святой Антоний ему и предсказал.

Их родственник Круглец, придворный князя, был так потрясён этой стойкостью, что крестился с именем Евстафий; вскоре и он был замучен и повешен на том же дубе. Всех троих погребли в Никольском храме, а на месте дуба потом построили Троицкую церковь. Мощи мучеников обрели нетленными; по просьбе православных литовцев святитель Алексий Московский ходатайствовал об их прославлении перед Константинопольским патриархом Филофеем, и уже в 1364 году патриарх прислал преподобному Сергию Радонежскому крест с частицами их мощей. Сам Ольгерд под конец жизни вернулся к христианству и принял иночество, все двенадцать его сыновей были христианами, а к концу XIV века половина жителей Вильны исповедовала православие. Ныне мощи святых пребывают в виленском Свято-Духовом монастыре, куда их вернули в 1946 году.