Сампсон был римлянином из богатой и знатной семьи. Образование ему дали хорошее, а врачебное дело он изучил особенно основательно — но не ради заработка: лечил он бесплатно и прежде всего бедняков. Понимая, что дела милосердия держатся не на характере, а на воспитанной душе, он много читал Священное Писание и много молился.

Когда родители умерли, Сампсон раздал всё наследство, исполнив буквально то, что Спаситель сказал богатому юноше в Евангелии. Рабов он отпустил на свободу и отправился в пустыню — жить строгой отшельнической жизнью. Но Промысл вывел его в Константинополь. Там, поселившись в небольшом доме, он начал принимать у себя странников, больных и нищих и служил им сам. Со временем это перестало быть подвигом и стало потребностью.

Прославил его случай с императором. Юстиниан I, правивший с 527 по 565 год, тяжело заболел, и придворные врачи ничем не помогли. Император стал молиться, и во сне ему показали человека, о котором было сказано: этот исцелит. Слуги обошли весь Константинополь, нашли Сампсона и привели во дворец. Он прикоснулся рукой к больному месту — и болезнь отступила. Благодарный император предлагал золото и серебро; Сампсон отказался и попросил вместо этого построить странноприимный дом и больницу. Юстиниан построил и приписал к ним поместья на содержание.

До глубокой старости преподобный продолжал своё служение. Кончина его, около 530 года, была мирной и безболезненной; тело погребли в храме священномученика Мокия.

После смерти его помощь не прекратилась. Когда в Константинополе случился сильный пожар и пламя дошло до его странноприимницы, здание уцелело: по молитвам преподобного полил сильный дождь. Придворный по имени Феодорит, оступившись, сильно повредил ногу — не мог ни ходить, ни спать, ни есть; он молился преподобному и на третий день получил исцеление: Сампсон явился ему, коснулся ноги и сказал, что болеть он больше не будет. А когда начальник странноприимного дома по имени Енесий стал небрежен в своих обязанностях, преподобный явился и ему — уже с грозным укором, и тот исправился.

Память преподобного Сампсона — 10 июля; в этот же день именины у носящих имя Самсон. Преподобных на иконах принято писать в монашеском одеянии, нередко со свитком в руке.